El virus de influenza ha sido reconocido como un importante patógeno en poblaciones humanas y animales, ya que es el principal causante de enfermedades respiratorias. Muchas vacunas y aislamientos de virus de influenza humana y animal son realizadas actualmente en huevos embrionados, siendo este el método usado tradicionalmente por décadas. Sin embargo, se han encontrado inconvenientes en la elaboración de vacunas ya que el proceso de fabricación es de capacidad limitada (se requiere aproximadamente un huevo para generar una dosis vacunal) y alta demanda tiempo, disminuyendo su habilidad para generar biológicos rápidamente en el caso de una pandemia. El empleo de líneas celulares continuas para la producción de vacunas virales nace como alternativa que ofrece diversas ventajas: (i) oportunidad de emplear células completamente caracterizadas y estandarizadas, (ii) producción y planeación permanente de vacunas y (iii) los biológicos pueden ser producidos de forma más rápida.El objetivo de esta revisión es analizar las diferentes alternativas empleadas en el cultivo y/o aislamiento de virus de influenza, enfatizando en el uso de cultivos celulares como sustrato para el aislamiento y la producción de biológicos destinados a la salud humana y animal.Influenza Virus has been recognized as an important pathogen in human and animal populations causing many respiratory diseases. Vaccine production and isolation of human and animal influenza viruses are made mainly in chicken embryo eggs, being the conventional method used for decades, however, several issues have been found for vaccine manufacture related with low efficiency of processes due to limited capacity of production (sometimes requiring one or two eggs to obtain a vaccine dose) and time spending that leads to decrease in the ability for fast vaccine production processes in a pandemic situation. The use of continuous cell lines for viral vaccine manufacture rises as a feasible choice offering several advantages including the opportunity to use fully characterized and standardized cells; in addition, cell-culture-derived vaccines don¿t require further planning and vaccines can be produced rapidly. The aim of this paper is to know different alternatives employed in culture and isolation of influenza viruses, emphasizing in the use of cell culture as a substrate for isolation and manufacture of vaccines for use in humans and animals.