Esta investigación tuvo como objetivo la evaluación del potencial antibacterial in vitro de Croton lechleri frente a aislamientos bacterianos aeróbicos de pacientes con úlceras cutáneas del Sanatorio de Agua de Dios, Cundinamarca, Colombia. La metodología utilizada incluyó el aislamiento e identificación de los aislamientos bacterianos utilizando el sistema automatizado BBL-CrystalTM. Para la evaluación de la susceptibilidad antimicrobiana in vitro, se realizaron pruebas de difusión en disco, dilución en agar y difusión en pozo, métodos estandarizados por The Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI); usando como sustratos el extracto etanólico y de éter de petróleo de Croton lechleri. Se obtuvieron siete aislamientos bacterianos a partir de las úlceras cutáneas de pacientes del sanatorio, el estudio también incluyó ensayos con cepas de referencia ATCC: Staphylococcus aureus (ATCC) y de Escherichia coli (ATCC) como control. En los ensayos de sensibilidad antimicrobiana in vitro, se evidencio que los extractos de Croton lechleri fueron efectivos frente a la mayoría de aislamientos bacterianos del estudio, siendo el extracto etanólico el de mayor potencial antibacterial y la técnica de difusión en pozo la que presento mejor sensibilidad y reproducibilidad.This study evaluated the in vitro antibacterial potential of Croton lechleri against aerobic bacterial isolates from patients with skin ulcers from Agua de Dios Sanitarium, (Cundinamarca, Colombia). Bacterial isolates were isolated and identified using the BBL-CrystalTM automated system. In vitro antimicrobial susceptibility was evaluated through disk diffusion, agar dilution and well diffusion, using standardized methods from the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Ethanol extract and petroleum ether from Croton lechleri were used as substrates. Bacterial isolates were obtained from skin ulcers of patients in the hospital. ATCC reference strains were included in the assays as controls: Staphylococcus aureus (ATCC) and Escherichia coli (ATCC). The antimicrobial sensitivity tests demonstrated that Croton lechleri extracts were effective against almost all strains included in this study. Ethanol extract showed the greater antibacterial potential. The technique that showed the best sensitivity and reproducibility in vitro was the diffusion well.