Actualmente existe gran interés en el metabolismo mineral y el papel de la vitamina D3 por su importancia en el entendimiento de la patogénesis de la osteoporosis y, en consecuencia, por sus aplicaciones terapéuticas y preventivas. La cuantificación de la Vitamina D implica varios pasos previos: separación, extracción y fraccionamiento, que requieren el desarrollo de diversos métodos buscando exactitud, precisión, rapidez y versatilidad. El presente estudio tuvo como objetivo cuantificar las concentraciones séricas de los principales metabolitos de la vitamina D3: 24-hidroxicolecalciferol, 24,25-dihidroxicolecalciferol y 1,25 dihidroxicolecalciferol expresados como vitamina D3 total en 50 pacientes con osteopenia u osteoporosis. El ensayo se realizó por un sistema de HPLC. La recuperabilidad post-extracción fue del 85%, la sensibilidad para el 1,25 dihidroxicolecalciferol fue de 12.37 pg/ml y del colecalciferol de 25 pg/ml. El promedio de Vitamina D3 total fue de 2072 ng/ml con un intervalo de 6.3 a 10600 ng/ml y se halló diferencia significativa en las medias de concentración de Vitamina D entre mujeres con DMO normal y las que tenían al menos osteopenia en cadera (p<0.04); sin embargo, esta diferencia no fue significativa en pacientes en columna. Se encontró una diferencia significativa de concentraciones medias de vitamina D entre casos con y sin antecedente de fractura (p=0.12). Se discute la relación de las concentraciones de vitamina D con los valores de densidad mineral ósea y variables clínicas, biológicas y sociodemográficas.Vitamin D estimate in women with osteopenia and osteoporosis in Cundinamarca, Colombia, by means of extraction in solid phase, liquid chromatography of high resolution and multivaried analysis At present great interest in the mineral metabolism exists and the role of the vitamin D3, by its importance in the understanding of the pathogenesis of the Osteoporosis and consequently by its preventive and therapeutic applications. The quantification of the Vitamin D implies various previous steps: separation, extraction and division that require the development of diverse methods seeking accuracy, precision, rapidity and versatility.The present study had as an objective to quantify the concentrations from serum of the main metabolites of the vitamin D3: 24-hidroxicolecalciferol, 24,25-dihidroxicolecalciferol and 1,25 dihidroxicolecalciferol aforesaid as vitamin D3 total in 50 patients with osteopenia or osteoporosis. The trial was carried out for a system of HPLC.The percent recovery post-extraction went of the 85%, the sensibility for the 1,25 dihidroxicolecalciferol went of 12.37 pg/ml and of the colecalciferol of 25 pg/ml. The average of Vitamin D3 total went of 2072 ng/ ml with an interval from 6.3 to 10600 ng/ml and was found differentiates significant in the Vitamin D concentration averages among women with DMO normal and the ones that had al less osteopenia in hip (p<0.04), nevertheless this difference was not significant in column. A significant difference of average concentrations of vitamin was found D among cases with and without antecedent of fracture (p=0.12). The relation of the concentrations of vitamin is discussed D with the bony mineral values of density and sociodemographic, biological, and clinical variables.